1、点击“File,在下拉菜单中选择 ” “New File,输入你想要的文件名,点 ” OK。出现以下界面
点击文件下的子文件,双击,进行你的序列导入。通常进行 RNA 结构的计
算时,输入的基因序列达到数千个之多, 但由于软件本身与电脑的计算能力有限,建议先查找目的物的亚基所对应的基因来分别进行计算。
同时通过人工输入长序列会很麻烦,在序列输入时可以 copy and paste。在序列输入框中右击出现的下拉菜单中选择
clipboard,在子菜单中选择 paste from,来粘贴你所复制的序列。然后回车。序列输入完毕。
2、二级结构的计算
序列导入完成后,于文件下子目录上右击在下拉菜单中选择 calculate,在子菜单中选择
structure(s),进行计算(各项条件默认,如果有条件可以改变条件设置)。以下为计算后程序框
双击蓝色部分:
在弹出的窗口上右击,选择 view structure。则出现了该序列的 2D 结构。
3、siRNA 靶点的筛选
在 siRNA 设计过程中,通过如 Ambiom siRNA Target Finder,所选取的可能的靶序列中,有些会存在空间阻碍,从而影响设计的
siRNA 的沉默效率。所以对得到的靶序列利用 RNAdraw 进行二级结构进行筛选。
通常利用 Ambiom siRNA Target Finder 所查找到的靶序列会标有序列起点核苷酸编号,通过这个编号在 RNAdraw
上进行序列筛选。
在 RNAdraw 的二级结构计算图上右击选择 show mode,在对话框中继续勾选 show bases和 loop numbers,选择
Label Rate为 1。
点击 ok 后出现了带有碱基,编号,还有二级序列的结构图, 右击可以进行放大
通过靶序列对应的核苷酸编号, 来对应基因二级结构上的序号, 惊醒空间结构的筛选。将空间阻碍大的序列进行排除。
4、文件的保存
在我们筛选完后可能有的结构还需要检查, 要对文件进行保存。 右键点击主文件,选择 save
file,保存到电脑。下次使用时,直接拖如程序框即可。